Ключова відмінність - імунофлуоресценція проти імуногістохімії
 

Діагностика хвороб, яка використовує молекулярно -біологічні методи, стала новою галуззю технології клінічної лабораторії. Він включає всі тести та методи ідентифікації захворювання та розуміння причини захворювання шляхом аналізу ДНК, РНК або експресованих білків в організмі. Швидкий прогрес у молекулярній діагностиці дозволив здійснити фундаментальні дослідження щодо заразних та неінфекційних захворювань. Вони використовуються для визначення змін у послідовності або рівнях експресії в найважливіших генах або білках, що беруть участь у захворюванні. Імунофлюоресценція (ІФ) та імуногістохімія (ІГХ) - це дві такі широко використовувані методики в біології раку. IF - це тип IHC, де метод виявлення флуоресценції використовується для аналізу моноклональних та поліклональних антитіл , тоді як IHC використовує хімічні методи для виявлення моноклональних та поліклональних антитіл. Це ключова відмінність IF та IHC.

ЗМІСТ

1. Огляд та ключові відмінності
2. Що таке імунофлюоресценція
3. Що таке імуногістохімія
4. Подібності між імунофлуоресценцією та імуногістохімією
5. Порівняльне порівняння - імунофлуоресценція проти імуногістохімії в табличній формі
6. Резюме

Що таке імунофлуоресценція (ІФ)?

Імунофлуоресценція - це метод виявлення, коли антитіла, що використовуються в аналізі, мітяться за допомогою флуоресцентних барвників або флуоресцентних білків з метою виявлення. Позначені вторинні антитіла можуть призвести до небажаних фонових сигналів; тому методика IF заснована на маркуванні самого первинного антитіла в даний час, щоб уникнути небажаних сигналів під час виявлення. За допомогою цієї методики запобігається неспецифічне зв'язування між первинним і вторинним антитілами , і це відбувається швидше, оскільки не передбачається вторинний етап інкубації . Якість даних також покращується.

Малюнок 01: Подвійне імунофлуоресцентне фарбування для BrdU, NeuN та GFAP

Флуорохроми або флуоресцентні барвники - це сполуки, які можуть поглинати випромінювання , переважно збуджене ультрафіолетове випромінювання. Коли частинки досягають основного стану з збудженого стану, вони випромінюють випромінювання, яке захоплюється і виявляється детектором для формування спектра. Дуже важливо, щоб флуоресцентна мітка була сумісною та стабільною для конкретної реакції, і її слід належним чином кон'югувати з антитілом, щоб отримати точні результати. Одним з найбільш часто використовуваних флуорохромів є ізотіоціанат флуоресцеїну (FITC), зеленого кольору, з піковими довжинами хвиль поглинання та випромінювання 490 нм та 520 нм відповідно. Родамін, інший агент, що використовується в ІФ, має червоний колір і має чіткі пікові довжини хвиль поглинання та випромінювання 553 нм та 627 нм.

Що таке імуногістохімія (IHC)?

IHC - це метод молекулярного тестування, який практикується з метою виявлення та підтвердження присутності антигену в клітині -мішені. Клітина -мішень може бути інфекційною частинкою, мікробним збудником або злоякісною пухлинною клітиною. IHC використовує моноклональні та поліклональні антитіла для визначення присутності антигенів, присутніх на клітинній поверхні клітин -мішеней. Методика заснована на зв'язуванні антиген-антитіло. Маркер виявлення кон'югується з цими антитілами для того, щоб виявити наявність або відсутність конкретного антигену. Ці маркери можуть бути хімічними маркерами, такими як ферменти, флуоресцентно міченими антитілами або антитілами, міченими радіо.

Малюнок 02: Зріз мишачого мозку, забарвлений за допомогою імуногістохімії

Найбільш популярне застосування IHC в біології ракових клітин для виявлення наявності злоякісних пухлин, але воно також використовується для виявлення інфекційних захворювань.

Які подібності між імунофлуоресценцією та імуногістохімією?

• Імунофлуоресценція та імуногістохімія відбуваються в умовах in vitro .
• Обидві методики засновані на антиген-антитіло
• Обидва методи дуже швидкі.
• Результати методик відтворюються.
• Обидва покращили якість даних.
• Ці методи використовуються в діагностиці раку та інфекційних захворювань.

Яка різниця між імунофлуоресценцією та імуногістохімією?

Резюме - Імунофлуоресценція проти імуногістохімії

Молекулярні механізми спричинили багато змін у галузі медицини, породивши передові методи молекулярного тестування, які спричинили революції в області діагностики. Ці винаходи призвели до швидкої та точної ідентифікації та підтвердження хвороби, що дозволило успішно вводити та виробляти ліки. Ці методи також використовуються у фармакології для того, щоб знайти цілі ліків та підтвердити фармакокінетичні властивості препарату під час метаболізму ліків. IF та IHC - це два методи діагностики, які ґрунтуються на концепції зв'язування антигену та антитіла, хоча спосіб виявлення в обох методиках відрізняється. IF використовує принцип флуоресценції для виявлення антигену, а IHC - концепцію хімічної кон'югації для виявлення антигену. Це різниця між IF та IHC.

Завантажити PDF -версію імунофлуоресценції проти імуногістохімії

Ви можете завантажити PDF -версію цієї статті та використовувати її для автономних цілей згідно цитати. Будь ласка, завантажте PDF -версію тут Різниця між імунофлуоресценцією та імуногістохімією.

Список використаної літератури:

1. Аокі, Валерія та ін. «Пряма та непряма імунофлуоресценція». Anais Brasileiros de Dermatologia, SociedadeBrasileira de Dermatologia, Доступно тут. Доступ 25 серпня 2017 року.
2. Дураян, Джеяпрадха та ін. «Застосування імуногістохімії». Журнал фармації та біологічних наук, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, серпень 2012 р., Доступний тут . Доступ 25 серпня 2017 року.

Зображення надано:

1. «Подвійне імунофлуоресцентне фарбування для BrdU, NeuN та GFAP» від Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey WH 2nd, Liu X.- Інтраназальна доставка трансформуючого фактора росту- бета1 у мишей після інсульту зменшує обсяг інфаркту та збільшує нейрогенез у підшлуночковій зоні; PMID 19077183 (CC BY 2.0) за допомогою Вікісховища
2. «Гіпоталамус тканини миші, пофарбований за допомогою ABC-імуногістохімії» Автор zabbn-Власна робота (CC BY-SA 3.0) за допомогою Commons Wikimedia

Схожі повідомлення:

Різниця між імуноцитохімією та імуногістохімією Різниця між гібридизацією In situ та імуногістохімією Різниця між північним південним та західним блотингом Різниця між векторами YAC та BAC Різниця між геномікою та протеомікою